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你了解荧光染色原理知识吗

 发布时间:2021-08-06 点击量:292
CytekTM Aurora光谱流式可配置高达5激光,3个散射光和64个荧光检测通道,能够满足所有实验室的需求。Aurora可以使用大量的荧光染料组合而无需为每个应用重新设置仪器。光学系统和低噪音的电子系统带来了超强的灵敏度和分辨率。拥有平顶光斑设计,结合独特的液流系统,充分保证了高流速采集样本的出色性能。
荧光染色原理:
免疫荧光染色:细胞膜上或细胞内的抗原分子与相应的荧光素标记McAb作用一定时间后形成带有荧光素的抗原抗体复合物,经激光激发后发出特定的荧光,其荧光强度与被测定抗原分子含量呈比例关系,由此可求得被测细胞与标记McAb相对应抗原的表达量和阳性细胞百分比。
常用的荧光染料有异硫氰酸荧光素(FITC)、藻红蛋白(PE)、别藻青蛋白(APC)和Perdinin叶绿素(PerCP)等,经488nm激光激发后其发射荧光光谱有差别,因而可将其用于标记不同的McAb进行单色或多色免疫荧光染色。目前,流式细胞术有单色、双色、三色、四色、五色荧光分析,对细胞的分析更加精密、深入。
免疫荧光染色常用方法:
直接免疫荧光法:用一种(单色)或者多种(多色)荧光素标记的McAb染色细胞后测量其荧光强度和阳性细胞数。
间接免疫荧光法:用一种McAb与细胞作用后,洗去未结合McAb,再加入荧光素标记的第二抗体(如羊抗鼠IgG-FITC),染色细胞后测量其荧光强度及阳性细胞数。