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全光谱流式细胞仪仪器的操作和使用流程

发布时间:2022-02-11      点击次数:126
  全光谱流式细胞仪的调试和校准:
  在使用前,甚至在使用过程中都要精心进行调试,以保证工作的可靠性和佳性。调试的项目主要是激光强度、液流速度和测量区的光路等。
  激光强度:除调整反射镜的角度以调整到所需波长的激光出光外,还要结合显示屏上的光谱曲线使激光的强度输出为大。
  液流速度:可通过操作台数字显示监督,调节 气体压力大小以获得稳定的液流速度。
  测量区光路调节 :这是调试工作的关键。需要保证在测量区的液流、激光束、90散射测量光电系统垂直正交,而且交点较小。一般可在用标准荧光微球等校准中完成。
  流式细胞术中所测得的量是相对值,因此需要在使用前或使用中对系统进行校准或标定,这样才能通过相对测量获得的意义。
  因而FCM中的校准具有双重功能:仪器的准直调整和定量标度。标准样品应该稳定,有形成份形状应是大小比较一致球形,样品分散性能良好,且经济、容易获得。

  全光谱流式细胞仪仪器的操作和使用流程:
  1、 打开电源,对系统进行预热;
  2、 打开气体阈,调节 压力,获得适宜的液流速度;开启光源冷却系统;
  3、 在样品管中加入去离子水,冲洗液流的喷嘴系统;
  4、 利用校准标准样品,调整仪器,使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上,0和90散射的荧光强度强,并要求变异系数为小;
  5、 选定流速、测量细胞数、测量参数等,在同样的工作条件下测量样品和对照样品;同时选择计算机屏上数据的显示方式,从而能直观掌握测量进程;
  6、 样品测量完毕后,再用去离子水冲洗液流系统;
  7、 因为实验数据已存入计算机硬盘(有的机器还备有光盘系统,存贮量更大),因此可关闭气体、测量装置,而单独使用计算机进行数据处理;
  8、将所需结果打印出来。
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