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光谱流式细胞仪的调试和校准是怎么进行的

发布时间:2022-06-26      点击次数:292
  光谱流式细胞术是一种基于常规流式细胞术的技术,其中光谱仪和多通道检测器代替了常规系统中的传统反射镜,滤光器和光电倍增管。流式细胞仪可以快速进行多参数收集并分析单个细胞或颗粒上的数据。
  光谱流式细胞仪可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把细胞亚群从中分选出来。仪器采用激光作为激发光源,保证其具有更好的单色性与激发效率;利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标记技术,保证检测的灵敏度和特异性;用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数信号进行数据处理分析,保证了检测速度与统计分析精确性。
  光谱流式细胞仪的调试和校准是怎么进行的:
  在使用前,甚至在使用过程中都要精心进行调试,以保证工作的可靠性和佳性。调试的项目主要是激光强度、液流速度和测量区的光路等。
  激光强度:除调整反射镜的角度以调整到所需波长的激光出光外,还要结合显示屏上的光谱曲线使激光的强度输出为大。
  液流速度:可通过操作台数字显示监督,调节气体压力大小以获得稳定的液流速度。
  测量区光路调节:这是调试工作的关键。需要保证在测量区的液流、激光束、90散射测量光电系统垂直正交,而且交点较小。一般可在用标准荧光微球等校准中完成。
  流式细胞术中所测得的量是相对值,因此需要在使用前或使用中对系统进行校准或标定,这样才能通过相对测量获得的意义。因而FCM中的校准具有双重功能:仪器的准直调整和定量标度。标准样品应该稳定,有形成份形状应是大小比较一致球形,样品分散性能良好,且经济、容易获得。
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