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全光谱流式细胞仪仪器优缺点分析

更新时间:2024-03-07      点击次数:295
  全光谱流式细胞仪是一种先进的流式细胞分析技术,它相较于传统流式细胞仪具有一些显著的优势,但也存在一些局限性。
  以下是全光谱流式细胞仪的优缺点:
  一、优点:
  1.更多的检测通道:光谱流式细胞仪可以提供多达38个或更多的荧光检测通道,这远远超过了传统流式细胞仪的通道数。
  2.光谱灵活性:由于能够检测400-900nm全范围光谱,这种仪器可以检测任何能被配置激光器激发的荧光染料,无需更换滤光片,提供了无限的灵活性。
  3.高光谱分辨率:光谱流式细胞仪能够解析和补偿调节分离高度重叠的荧光团,即使在光谱重叠度很高的两种荧光染料也可以同时使用。
  4.扩展性强:可以通过增加激光器数量来进一步扩展检测通道,例如,配备5根激光器可以实现64个荧光检测通道。
  二、缺点:
  1.成本较高:由于其复杂的光学系统和数据处理需求,光谱流式细胞仪的成本通常高于传统流式细胞仪。
  2.操作复杂:相比于传统流式细胞仪,光谱流式细胞仪的操作和维护可能更为复杂,需要专业的技术人员进行操作和管理。
  3.数据分析难度:由于数据量的大幅增加,流式细胞仪产生的数据分析和解释可能需要更高级的计算工具和专业知识。
  全光谱流式细胞仪与传统流式之间的区别:
  传统流式和光谱流式之间的第一个重要区别是色散。传统流式是根据波长来阻挡、反射或传输光子的,而光谱流式是根据波长来色散光子的。最常见的色散光学元件是棱镜和光栅。棱镜是一种典型的色散光学元件,它根据波长的不同来折射光线。棱镜的通量通常很高(>90%),色散发生在宽波长范围内,但色散是非线性的,光谱分辨率随着波长的变化而变化,通常在可见光谱中变化几纳米。光栅在特定波长下具有更高分辨率的线性色散,但高阶衍射的存在会降低效率和通量,增加杂散光。体积相位全息光栅,在他们的最佳波长,也可以提高效率和分辨率,而且杂散光的强度较低。除了色散问题,其他光学效应,如球面像差,也会影响性能。大多数商用摄谱仪的设计都是为了最小化这些问题,以提供最大的光学性能。
  传统流式和光谱流式的第二个主要区别是检测器。棱镜或光栅产生的连续光谱的测量需要一个线性阵列的检测器。检测阵列的密度和间距,以及色散光学的性能,共同决定分辨率。近年来,检测技术发展迅速,目前光流式的检测器主要有CCD和多阳极PMT。
 

全光谱流式细胞仪

 

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