单细胞多重功能蛋白分析系统可以同时捕获成千上万的单个活细胞的完整生物分子和功能信息,且整个分析过程中细胞处于存活状态,即可在单细胞水平上实时监测活细胞实际分泌的多达32种蛋白的表达。
产品特点:
高通量:每张芯片有12000个微通道,可同时捕获500-1500个单细胞的多功能蛋白组学信息,可同时运行8张芯片
多重性:同时测定每个活细胞30+的分泌蛋白
全自动:样本进,结果出,职需添加样本,全自动进行单细胞捕获、培养、多重ELISA、数据分析
操作流程:
实验前准备:
样本处理:确保细胞悬液活性>90%,浓度调整至1-5×10⁶ cells/mL,避免团块。
芯片水化:将IsoCode芯片置于培养基中预水化30分钟,激活微室内的抗体阵列。
试剂准备:准备好ELISA检测试剂盒(含捕获抗体、检测抗体、荧光二抗等),所有试剂提前平衡至室温。
单细胞加载与捕获:
使用自动进样器将细胞悬液注入IsoCode芯片。
系统通过微流控技术将单个细胞分配至12,000个独立微室中,每个微室仅容纳一个细胞。
流体动力学设计确保细胞均匀分布,避免多细胞聚集。
细胞培养与蛋白分泌:
芯片转入恒温培养模块(37℃,5%CO₂),细胞在微室内存活并持续分泌蛋白。
培养时间根据实验目的设定:
T细胞功能分析:通常为6-24小时;
动态监测:可分时段多次成像,捕捉分泌动力学变化。
自动化蛋白检测:
系统自动加入ELISA试剂,通过夹心法对分泌蛋白进行原位检测。
每个微室可同步检测多达32种蛋白(如IFN-γ、IL-2、TNF-α、Granzyme B等)。
荧光信号由高灵敏度成像系统采集,检测下限低至2pg/mL。
数据分析与报告生成:
数据自动导入IsoSpeak软件平台,完成以下分析:
单细胞蛋白表达谱绘制;
细胞亚群聚类(如高分泌型、多功能型);
计算细胞多功能强度指数(PSI),量化细胞功能质量。
软件输出可直接用于发表的图表,支持多维可视化(热图、散点图、雷达图)。